用lamp儀做lamp實驗和用pcr儀做lamp檢測的區別是什么?為什么用pcr儀可以做lamp檢測還要花那么多錢買lamp
LAMP技術的原理是采用4條引物來識別靶基因上的6個特異區域,利用鏈置換型DNA聚合酶,置于60-65℃的恒溫條件下進行擴增,反應會產生大量的焦磷酸鎂白色沉淀,可以通過肉眼直接觀察或者加入熒光染料觀察顏色變化。
LAMP方法只需要恒溫條件就能進行反應,一般在一小時內就能完成,從這個方面來看是可以使用普通PCR儀進行反應的,但是因為LAMP反應具有高靈敏度,擴增效率高,所以我們用普通pcr儀進行實驗并不能很好的確定反應時間,可能最佳反應時間是40min,你卻統一的采用60min,長時間的反應可能導致非特異性擴增的出現,本來是陰性的反應也出現了擴增,但我們還以為是污染了。LAMP濁度儀能將擴增和檢測同時完成,不需要像使用PCR儀那樣反應完后來進行后續的檢測步驟,比如電泳,開蓋后容易使得氣溶膠溢出,從而污染實驗室造成假陽性,而用LMAP儀器就不會存在這個問題,能很好的避免污染問題。LAMP實時濁度儀不僅能夠特異性的對引物進行篩選,還能對引物工作的最佳濃度,反應時間的控制,非特異性擴增進行判斷,為診斷試劑的研發提供判斷標準。前期的研究階段推薦使用LAMP實時濁度檢測系統,條件都摸索好之后使用什么儀器都可以。
氣溶膠粒徑分析儀和氣溶膠徑譜儀的區別
氣溶膠是指長時間懸浮在氣體環境中,能觀察或測量到的液體或圖體粒子的集合。在氣溶膠測量儀器校準,室內顆粒物運動特性研究,呼吸道顆粒運動規律研究,空氣過濾器效率檢測等空氣檢測和監測領域,都需要用到能夠發生穩定的,可重復性的單分散或多分散型氣溶膠發生器,是冷發生型多分散氣溶膠發生器。
蘇信氣溶膠發生器是基于LasKin原理噴嘴技術,在壓縮空氣的作用下,用噴嘴使DEHS冒泡霧化,大顆粒液滴被擋板擋回液面,小的顆粒隨氣流逸出形成氣溶膠,粒徑分布在1um以下。
lamp的優缺點
環介導等溫擴增方法優點:靈敏度高(比傳統的PCR方法高2~5個數量級);反應時間短(30~60分鐘就能完成反應);臨床使用不需要特殊的儀器(試劑盒研發階段推薦用實時濁度儀);操作簡單(不論是DNA還是RNA,檢測步驟都是需將反應液、酶和模板混合于反應管中,置于水浴鍋或恒溫箱中63℃左右保溫30~60分鐘,肉眼觀察結果)。
環介導等溫擴增方法缺點:靈敏度高,一旦開蓋容易形成氣溶膠污染,加上目前國內大多數實驗室不能嚴格分區,假陽性問題比較嚴重,因此我們強烈推薦在進行試劑盒的研發過程中采用實時濁度儀,不要把反應后的反應管打開;引物設計要求比較高,有些疾病的基因可能不適合使用環介導等溫擴增方法。
本網站文章僅供交流學習 ,不作為商用, 版權歸屬原作者,部分文章推送時未能及時與原作者取得聯系,若來源標注錯誤或侵犯到您的權益煩請告知,我們將立即刪除.