DNA提取試劑盒哪種好? 用試劑盒提取DNA需要注意什么?
一、DNA提取試劑盒哪種好?
植物基因組DNA提取試劑盒 細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒 動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒 全血基因組DNA提取試劑盒(吸附柱法) 酵母基因組DNA提取試劑盒 真菌基因組DNA提取試劑盒 土壤基因組DNA提取試劑盒 通用基因組DNA提取試劑盒 糞便基因組DNA提取試劑盒 采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),提取細(xì)菌基因組DNA。
離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料,能夠高效專一吸附DNA,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、 PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。二、用試劑盒提取DNA需要注意什么?
你說(shuō)的是粗提取吧?注意事項(xiàng):first實(shí)驗(yàn)材料不能用豬血代替雞血,因?yàn)椴溉閯?dòng)物成熟紅細(xì)胞木細(xì)胞核兒~
~second制備雞血細(xì)胞液時(shí),注意向雞血中加入檸檬酸鈉,防止血液凝固3攪拌時(shí)沿一個(gè)方向攪拌4使細(xì)胞脹破時(shí)加速攪拌5用遇冷酒精處理過(guò)之后沿一個(gè)方向均勻攪拌。6檢驗(yàn)DNA時(shí)二苯胺試劑現(xiàn)配現(xiàn)用
三、DNA提取方法?
DNA的提取方法
一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細(xì)胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法:破碎細(xì)胞同上,然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細(xì)胞,將裂解物鋪于乙醇上,然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪,DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態(tài))
五.表面活性劑快速制備法:用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細(xì)胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備:加熱96℃-100℃,五分鐘,然后離心后取上清,可用于PCR反應(yīng)。
七.堿變性快速制備:先用NaOH作用20分鐘,再加HCI中和,離心后取上清,含少量DNA。
四、DNA怎么提取?
DNA提取的幾種方法
(1).濃鹽法
利用RNP和DNP在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1M 氯 納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的 氯仿一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質(zhì),此時(shí)蛋白質(zhì)凝膠停留在水相及氯仿相中間,而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA 鈉鹽沉淀出來(lái).
也可用0.15 MNaCL液反復(fù)洗滌細(xì)胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白,再按氯仿---異醇法除去蛋白.
兩種方法比較,后種方法使核酸降解可能少一些.
以稀鹽酸溶液提取DNA 時(shí),加入適量去污劑,如SDS可有助于蛋白質(zhì)與DNA 的分離。在提取過(guò)程中為抑制組織中的DNase對(duì)DNA 的降解作用,在氯化鈉溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15MNaCL,0.015M檸檬鈉,并稱SSC溶液,提取DNA.
(2).陰離子去污劑法:
用SDS或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質(zhì)變性,可以直接從生物材料中提取DNA .由于細(xì)胞中DNA與蛋白質(zhì)之間常借靜電引力或配位鍵結(jié)合,因?yàn)殛庪x子去污劑能夠破壞這種價(jià)鍵,所以常用陰離子去污劑提取DNA.
(3).苯酚抽提法:
苯酚作為蛋白變性劑,同時(shí)抑制了DNase的降解作用.用苯酚處理勻漿液時(shí),由于蛋白與DNA 聯(lián)結(jié)鍵已斷,蛋白分子表面又含有很多極性基團(tuán)與苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。離心分層后取出水層,多次重復(fù)操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性質(zhì),用乙醇沉淀DNA 。此時(shí)DNA是十分粘稠的物質(zhì),可用玻璃漫漫繞成一團(tuán),取出。此法的特點(diǎn)是使提取的DNA保持天然狀態(tài) .
( 4).水抽提法:
利用核酸溶解于水的性質(zhì),將組織細(xì)胞破碎后,用低鹽溶液除去RNA,然后將沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,離心后收集上清液.在上清中加入固體氯化鈉調(diào)節(jié)至2.6M.加入2倍體積95%乙醇,立即用攪拌法攪出.然后分別用66% ?80%和95%乙醇以及丙銅洗滌,最后在空氣中干燥,既得DNA樣品.此法提取的DNA中蛋白質(zhì)含量較高,故一般不用.為除蛋白可將此法加以改良,在提取過(guò)程中加入SDS.
五、怎樣提取DNA?
DNA提取是從細(xì)胞中分離和純化DNA的過(guò)程。下面是一種常見(jiàn)的基本方法。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1. 從含有DNA的樣本(比如血液、細(xì)菌、植物等)中采集細(xì)胞并將其釋放到一個(gè)離心管中。
2. 加入細(xì)胞裂解液,用來(lái)破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,釋放出細(xì)胞內(nèi)的DNA。
3. 加入蛋白酶,將細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)降解掉。通常使用絲氨酸蛋白酶或蛋白酶K。
4. 加入鹽,使得DNA與其他細(xì)胞成分分離。鹽可以使DNA形成一個(gè)粘稠的團(tuán)塊,從而方便分離和純化。
5. 加入冷酒精,使得DNA在酒精中沉淀并凝聚成片。通常使用70%的乙醇或異丙醇。
6. 使用微量孔徑濾器或離心機(jī)進(jìn)行分離和純化,去除其它雜質(zhì),使DNA得以分離和純化。
注意事項(xiàng):
1. 在實(shí)驗(yàn)中使用的工具和材料要徹底消毒,以避免細(xì)菌和其他污染物的干擾。
2. 在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要保持樣品溫度低,以防止DNA分解。
3. 在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,不能使用過(guò)多的酒精或其他重質(zhì)組分,否則DNA可能會(huì)被破壞。
六、誰(shuí)知道天根血液DNA提取試劑盒BufferGB成分是什么?
天根的是提取蠟塊的組織的比較好,志昂磁珠提取血的快,也簡(jiǎn)單,我們都用這個(gè)
七、土壤提取方法?
土壤溶液提取方法很多,主要看提取土壤溶液之后用于做什么。
常見(jiàn)的就是土水比1:2.5/1:5,這個(gè)就是稱取一份土,加入2.5/5份重量的水就可以了,主要用來(lái)測(cè)土壤pH值之類(lèi)的;
還有就是做土壤交換性陽(yáng)離子量,制作土壤溶液的時(shí)候還需要分中性土、酸性土或者鹽堿土,不同土樣提取方法也不同。
如果是測(cè)土壤中NPK的含量,這個(gè)提取方法就更多了。
所以,具體情況,具體分析。
八、dna的提取方法?
DNA的提取方法有7種:酚抽提法、甲酰胺解聚法、玻璃棒纏繞法、異丙醇沉淀法、表面活性劑快速制備法、加熱法快速制備、堿變性快速制備。
DNA的提取原則
1、保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性;
2、核酸樣品中不應(yīng)存在對(duì)酶有抑制作用的有機(jī)溶劑和過(guò)高濃度的金屬離子;
3、其他生物大分子如蛋白質(zhì)、多糖和脂類(lèi)分子的污染應(yīng)降低到最低程度;
4、其他核酸分子,如RNA,也應(yīng)盡量去除。
九、提取dna的材料?
原則上來(lái)說(shuō),凡是含有DNA的生物 材料都可以考慮。哺乳動(dòng)物的血液不能 夠作為提取DNA的材料,因?yàn)椴溉閯?dòng)物 的成熟的紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核,不含有 DNA。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中,一般要選用DNA 含量相對(duì)較高的生物組織,這樣成功的 可能性更大。例如,雞血就常用作提取 DNA的材料,因?yàn)殡u血細(xì)胞核DNA含 量豐富而且容易得到
十、病毒DNA提取技巧?
以下是從動(dòng)物病毒中快速提取DNA的方法,請(qǐng)參考該方案采用離心操作,適合于從動(dòng)物組織樣品中快速提取病毒基因組DNA。以下步驟都在室溫下進(jìn)行。
1.取50-100mg的動(dòng)物組織加入約3倍體積的生理鹽水進(jìn)行勻漿,充分勻漿后10,000rpm離心2min去除殘余組織。
2.取150μl上清液至新的潔凈離心管中。
3.加入500μlDNA提取液至上清液中,顛倒混勻,室溫靜置5-10min裂解病毒。
4.把DNA吸附柱裝在2ml收集管中,把裂解后的液體全部轉(zhuǎn)移至DNA吸附柱中,10,000rpm離心1min。
5.倒棄濾液,把DNA吸附柱裝回收集管中,加入400μl洗滌液至DNA吸附柱中,10,000rpm離心1min。注:洗滌液初次使用前請(qǐng)先加入48ml無(wú)水乙醇。使用完立即蓋上蓋,以防乙醇揮發(fā)。
6.重復(fù)步驟5。
7.倒棄收集管中的濾液,把DNA吸附柱裝回收集管中,10,000rpm離心3min。
8.把DNA吸附柱裝在新的潔凈離心管中,加入30-50μl洗脫液至吸附柱中央,靜置1-2min,10,000rpm離心1min,所得即為DNA溶液,可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),若暫時(shí)不用,應(yīng)于-20℃可儲(chǔ)存。
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