血脂測(cè)定方法儀器
1.血清TC測(cè)定:化學(xué)抽提法—ALBK法為目前國(guó)際上通用的參考方法。衛(wèi)生部北京老年醫(yī)學(xué)研究所生化室建立的高效液相色譜(HPLC)法也推薦作為我國(guó)TC測(cè)定的參考方法。
建議酶法[如膽固醇氧化酶- 過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(CHOD-PAP法)](以膽固醇酯酶水解血清中的膽固醇酯,同時(shí)以膽固醇氧化酶將膽固醇氧化成膽甾烯酮并產(chǎn)生過氧化氫,終點(diǎn)產(chǎn)物的測(cè)定應(yīng)用最廣的是Trinder顯色反應(yīng)系統(tǒng),試劑含過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚。)作為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清TC的常規(guī)方法。
2.血清TG測(cè)定:目前尚無公認(rèn)的TG測(cè)定的參考方法,二氯甲烷-硅酸-變色酸法是美國(guó)疾病預(yù)防與控制中心(CDC)測(cè)定TG采用的參考方法。衛(wèi)生部北京老年醫(yī)學(xué)研究所建立的HPLC 測(cè)定總甘油和游離甘油的方法擬推薦為我國(guó)TG測(cè)定的參考方法。
建議酶法[如甘油磷酸氧化酶-過氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(GPO-PAP 法)]作為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清TG的常規(guī)方法。一般臨床實(shí)驗(yàn)室可采用一步GPO-PAP法,有條件的實(shí)驗(yàn)室(如三級(jí)以上醫(yī)院)應(yīng)考慮開展游離甘油的測(cè)定或采用兩步酶法。
3.血清HDL-C測(cè)定:超速離心結(jié)合ALBK法為HDL-C測(cè)定的參考方法。硫酸葡聚糖-鎂沉淀法(DS法)結(jié)合ALBK法被美國(guó)膽固醇參考方法實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)(CRMLN)作為指定的比較方法(DCM法)。1995年中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)曾在國(guó)內(nèi)推薦的磷鎢酸鎂沉淀法(PTA-Mg2+法),但此法的主要缺點(diǎn)是標(biāo)本需預(yù)先離心處理,結(jié)果易受高TG影響。
建議勻相測(cè)定法作為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清HDL-C的常規(guī)方法??晒┻x擇的方法主要有:清除法(Clearance method),PEG修飾酶法(PEGME法),包括反應(yīng)促進(jìn)劑-過氧化物酶清除法(SPD法)和過氧化氫酶清除法(CAT法),選擇性抑制法(PPD法),免疫分離法(IS法)包括PEG/抗體包裹法(IRC法)和抗體免疫分離法(AB法)。
4.血清LDL-C測(cè)定:超速離心結(jié)合ALBK法為L(zhǎng)DL-C測(cè)定的參考方法。1995年中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)曾在國(guó)內(nèi)推薦聚乙烯硫酸沉淀法(PVS法)作為L(zhǎng)DL-C測(cè)定的常規(guī)方法,但此法的主要缺點(diǎn)是標(biāo)本需預(yù)先離心處理,結(jié)果易受高TG影響。
建議勻相測(cè)定法作為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清LDL-C的常規(guī)方法??晒┻x擇的方法主要有:表面活性劑清除法(SUR法),過氧化氫酶清除法(CAT法),杯芳烴法(CAL法),可溶性反應(yīng)法(SOL法)和保護(hù)性試劑法(PRO法)。
5.血清apoAI和apoB測(cè)定:目前尚無公認(rèn)的血清apoAI和apoB測(cè)定的參考方法。目前臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清apoAI、apoB含量的方法主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和免疫濁度法[包括免疫散射比濁法(INA)和免疫透射比濁法(ITA)]。
建議免疫濁度法作為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清apoAI、apoB的常規(guī)方法,首選ITA法,其次為INA法。
6.血清Lp(a)測(cè)定:目前尚無公認(rèn)的血清Lp(a)測(cè)定的參考方法。目前臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清Lp(a)的方法主要有ELISA和免疫濁度法,其中以ITA法最為常用。
建議免疫濁度法作為臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定血清Lp(a)的常規(guī)方法。試劑所用抗體應(yīng)為多克隆抗體或混合數(shù)株識(shí)別 apo(a)上不同抗原位點(diǎn)的單克隆抗體。首選ITA法,其次為INA法。
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