高效液相色譜原理(高效液相色譜原理和操作)
一、高效液相色譜工作原理?
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。
高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。
二、高效液相色譜手性分離原理?
被分析樣品(氣體或液體汽化后的蒸汽)在流速保持一定的惰性氣體(成為載氣或流動相)的帶動下進入填充有固定相的色譜柱,在色譜柱中樣品被分離成一個個的單一組分,并以一定的先后次序從色譜柱流出,進入檢測器,轉變成電信號,再經放大后,由記錄器記錄下來,在記錄紙上得到一組曲線圖(稱為色譜圖),根據色譜峰的峰高或峰面積就可以定量測定樣品中各個組分的含量
三、高效液相色譜外標法原理?
1.方法不同
內標法是在分析樣品的混合物中加入一定重量的純物質作為內標,然后對含有內標的樣品進行色譜分析,分別確定內標和待測組分的峰面積和相對校正因子。外標法是在空白溶劑中加入一定量的梯度標準物質制成對照品,并與未知樣品平行處理檢測。
2.要求不同
內標法對于內標的選擇要有一定的原則,適合于小樣本量的分析,而且樣品中的所有組分都不要求達到峰值,只要內標和有關組分達到峰值并且分離良好..外標要求儀器具有可重復性,適用于大量分析樣品,因為儀器會隨著使用而變化,所以應定期進行曲線校正。
3.難易成度不同
內標法必須準確稱量樣品和內標,否則會影響實驗結果,操作困難..外標法不需要測量校正因子。操作簡單,計算方便。
四、超高效液相色譜串聯質譜儀原理?
實驗方法原理 高效液相色譜-串聯質譜法,即以高效液相色譜為分離手段,以質譜為鑒定和測定手段,通過適當接口將兩者連接成完整儀器。 試樣通過液相色譜系統進樣,由色譜柱分離,而后進入接口。在接口中,試樣由液相中的離子或分子轉變成氣相離子,然后被聚焦于質量分析器中,根據質荷比而分離。最后離子信號被轉變為電信號,由電子倍增器檢測,檢測信號被放大后傳輸至計算機數據處理系統。
五、高效液相色譜熒光法原理?
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。
高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:
①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。
③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
④高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,進樣量在μL數量級。
⑤應用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。
六、高效液相色譜基本原理?
1、高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測。
2、高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:
(1)高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
(2)高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。
七、高效液相色譜的正反色譜的原理是什么呢?高效?
簡單的說:色譜分離的原理就是物質在固定相和流動相之間的分配系數存在差異,經過多次反復吸附解吸或者溶解揮發,最后達到分離。液相色譜就是流動相是液體。反相指固定相的極性小于流動相的極性。定性通過保留時間定量通過峰面積同一物質在相同色譜條件下保留時間一致,需要對照品比對定性。
同一物質的濃度與峰面積成正比例關系,所以根據對照品的濃度和峰面積,可以定量得出樣品的濃度。不夠詳細,就這些吧!
八、什么是高效液相色譜?
高效液相色譜是一種色譜分離方法。它是以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,經進樣閥注入待測樣品,由流動相帶入柱內,在柱內各成分被分離后,依次進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。
這種方法已成為化學、生化、醫學、工業、農業、環保、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術,是分析化學、生物化學和環境化學工作者手中必不可少的工具。
九、高效液相色譜檢測方法?
高效液相色譜法(High Performance Liquid ChromatographyHPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。
高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。
該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用。 歷史 1903年俄國植物化學家茨維特(Tswett)首次提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。
十、高效液相色譜通道設置?
1).首先對流動相進行過濾,根據需要選擇不同的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。
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2).對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
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3).正常情況下,儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘,然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑,則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘,直至色譜柱中有機相沖凈為止)。
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4).一般情況下,流動相沖洗20-30分鐘后,儀器方可穩定,最重要的是儀器基線走后,方可進樣測試。
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5).同時進兩針標樣,將其結果相比較,其結果的比值在0.98-1.02之間后,就可以正式進行樣品的測試了。
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6).樣品測試結束后,就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑,同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘,方可用有機相進行保護,否則,有損色譜柱。
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7).關機時,先關計算機,再關液相色譜。
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8).填寫登記本,由負責人簽字
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