液相色譜法的設備
一、液相色譜法的設備
高效液相色譜儀由輸出泵、進樣裝置、色譜柱 、梯度沖洗裝置、檢測器及數據處理和微機控制單元組成。輸出泵的功能是將沖洗劑在高壓下連續不斷地送入柱系統,使混合物試樣在色譜中完成分離過程 。常用的進樣方式有3種:注射器隔膜進樣、閥進樣和自動進樣器進樣。色譜柱的功能是將混合物中各組分分離。梯度沖洗又稱溶劑程序,通過連續改變沖洗劑的組成,改善復雜樣品的分離度,縮短分析周期和改善峰形,其功能類似于氣相色譜中的程序升溫。檢測器的功能是將從色譜柱中流出的已經分離的組分顯示出來或轉換為相應的電信號,主要有紫外吸收檢測器、熒光檢測器、電化學檢測器和折光示差檢測器,其中以紫外吸收檢測器使用最廣?,F代化的儀器都配有計算機,以實現自動處理數據、繪圖和打印分析報告。
二、高效液相色譜儀有哪些主要組成部件,各有什么作用?
高效液相色譜儀由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動時,經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程。
各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。
擴展資料:
使用高效液相色譜時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質與固定相的相互作用不同,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,最后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。
高效液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛的應用于化學和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發、分子量大、不同極性的有機化合物。
參考資料來源:百度百科-高效液相色譜儀
三、液相色譜儀的使用方法以及注意事項有哪些?!
液相色譜儀的品牌、種類很多,各家的使用方法也不盡一樣,主要看你是那一款的液相色譜儀,當初購買設備時,廠家的工程師會培訓使用方法。建議你還是多跟你的設備廠家的工程師聯系,發一份島津LC-10ATvp的液相色譜儀作業指導書你參考一下,內容也包含使用中的注意事項。
LC-10ATvp的液相色譜儀作業指導書
1.目的
規范LC-10ATvp液相色譜儀使用及維護保養操作規程,使其能在正常條件下工作。
2.范圍
適用于島津LC-10ATvp高效液相色譜儀的使用和維護。
3.責任人
檢測員、設備管理員
4.內容
4.1系統組成
SPD-10Avp 檢測器,LC-10ATvp泵,N-2000工作站。
4.2 操作方法
4.2.1開機前檢查
儲液瓶倒凈,換上實驗需要的流動相(抽濾并超聲過的)。
4.2.2開機
按溶劑輸液泵上的power鍵,待自檢完畢后開始進行操作。
4.2.3排氣
逆時針旋轉排氣閥(不可超過180°),打開排氣閥,按purge鍵排氣泡,在此期間流動相連續流出并且無氣泡;按purge鍵,泵停止,將排液閥旋鈕順時針方向旋轉到底,關閉排液閥
4.2.4沖流動相
按Pump鍵,泵啟動,觀察屏幕上壓力顯示,壓力上升平穩后,繼續按上述方法升高流速,使流速上升到實驗需要的流速。
4.2.5進樣
打開檢測器,調節波長為實驗需要的波長;打開工作站,查看基線,待基線走平后,進樣。
4.3 使用后維護
4.3.1 水或含水甲醇溶液沖洗
使用結束后,將流速降到0.1 ml/min,按Pump鍵,泵停止。換下流動相,換上已抽濾并超聲過的純凈水或含水甲醇溶液。按Pump鍵,泵啟動,觀察屏幕上壓力顯示,壓力上升平穩后,繼續按上述方法升高流速。如流動相含有無機鹽,必須保證足夠的沖洗時間。
4.3.2甲醇溶液沖洗
換上已抽濾并超聲過的甲醇溶液,按3.1的操作進行封柱處理。
4.4 關機
按Pump鍵,關閉泵;關閉桌面在線工作站;按Power鍵關閉LC-10ATvp。
5.注意事項
5.1 不能使用濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、二氯甲烷、氯仿、二甲基亞砜等作為流動相。
5.2 流動相溶劑選擇HPLC為準的溶劑,使用前必須用過濾器(0.45μm以下)
除去微粒或塵埃。
5.3 流動相溶劑必須進行脫氣。若不脫氣則在溶劑混合時或壓力、溫度變化時容易產生氣泡,會引起泵的誤動作和生產檢測器信號噪音。
5.4 以硅膠作載體的化學鍵合填充劑的穩定性受流動相pH值的影響,使用時應詳細閱讀該柱的說明書,在規定的pH值范圍內使用。使用時,可在泵與進樣器之間連接一硅膠柱,以保護分析柱。當使用高PH或含鹽的流動相時,盡可能縮短使用時間,用后立即沖洗。
5.5 分析結束后,從色譜流路系統,泵、進樣器、色譜柱至檢測器流通池,均應充分沖洗,特別是含鹽的流動相,更應注意先用水、再用含水甲醇溶液充分沖洗。如發現嚴重故障,應與廠家聯系維修。
5.6 請在使用前充分閱讀作業指導書,不得擅自拆卸儀器的零部件。
6.日常維護
6.1 維護周期
15-30天為一個周期。
6.2 維護前準備
6.2.1 擦去前面板和主箱蓋上的灰塵。
6.2.2 使用紙或軟布沾少許水擦去鍵板上的灰塵。
6.3 檢查控制面板
6.4 管路徹底清洗
6.4.1將儲液瓶中的流動相更換為異丙醇或30%異丙醇或10%異丙醇,放入吸濾器。
6.4.2松開柱兩端的螺帽,從管路中卸下色譜柱,在原來界色譜柱的位置接一阻力管(0.1mmI.D.×2m長)或接一空的預柱管。
6.4.3按“pump”鍵,設定流速為1-2ml/min,輸液2小時。
6.4.4更換甲醇,設定流速為1-2ml/min,輸液1小時。
6.4.5更換水,設定流速為1-2ml/min,輸液1小時。
6.4.6更換甲醇,設定流速為1-2ml/min,輸液1小時。
6.5維護后的漏夜檢查
維護后,啟動泵輸液,檢查管路中是否有漏液,如果存在漏液,采取適當措施。
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