一、高效液相色譜在測定樣品中如何選擇流動相的比例？

首先，知道要測樣品的性質，參考選擇比例。

其次，找到參考文獻，參考著調整比例。

如果已經確定了移動相是什么，建議每個比例都測試。

比如5:95,10:90,20:80~~~

這樣會在不同的RT出現不同樣子的峰，整理好數據，有利于將來寫論文。

二、高效液相色中，為什么要對流動相脫氣？

流動相脫氣的目的：

使色譜泵的輸液準確：輸液量均勻準確，并且脈動減小；保留時間及色譜峰面積的重現性提高。提高檢測的性能：防止氣泡引起的尖峰；基線穩定，信噪比增加；溶劑的紫外吸收本底降低。

保護色譜柱：減少死體積；防止填料的氧化。

三、高效液相和超高效液相的區別在那？

區別如下；

1、超高效液相系統耐壓更高，可以以更高的流速進行分析，并且在高流速下仍能保持很好的理論塔板數。

2、高效指的就是效率更高，即在同樣的時間內可以分析更多的樣品。高效液相色譜是相對經典液相色譜來說的，高效液相色譜具有更細的流動相傳輸管路，內徑更細的色譜柱，從而使死體積變小，理論塔板數更高，分析時間更短。超高效就是通過提高流速來減小出峰時間，縮短樣品流出速度，從而提高單針的分析時間來實現比高效液相更加“高效”的。

3、超高效液相需要整個液相色譜系統，包括色譜柱都具有很高的耐壓能力，故其所用的配件和色譜柱一般均為專用，不可用高效液相色譜柱代替。

四、超高液相和高效液相的區別？

APSH-6000高效液相色譜儀與超高效液相色譜儀的區別

超高效液相色譜儀的原理與APSH-6000高效液相色譜儀基本相同，所改變的地方有以下幾點：

小顆粒、高性能微粒固定相的出現。APSH-6000高效液相色譜的色譜柱，例如常見的十八烷基硅膠鍵合柱，它的粒徑是5um，而超高效液相色譜的色譜柱，會達到3.5um，甚至1.7um。這樣的孔徑更加利于物質分離

（2）超高壓輸液泵的使用。

由于使用的色譜柱粒徑減小，使用時所產生的壓力也自然成倍增大。故液相色譜的輸液泵也相應改變成超高壓的輸液泵。

（3）高速采樣速度的靈敏檢測器。

（4）使用低擴散、低交叉污染自動進樣器。配備了針內進樣探頭和壓力輔助進樣技術；

（5）儀器整體系統優化設計。色譜工作站配備了多種軟件平臺，實現超高效液相分析方法與高效液相分析方法的自動轉換。

與傳統的HPLC相比，UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍，它縮短了分析時間，同時減少了溶劑用量降低了分析成本。

不過由于實驗過程中儀器內部壓力過大，也會產生相對應的問題。例如泵的使用壽命會相對降低，儀器的連接部位老化速度加快，包括單向閥等部位零件容易出現問題等。

五、高效液相色中為什么要用“娃哈哈”純凈水？

這個實驗所用的水是純凈水，康師傅是礦物質水里面的礦物質肯定會對實驗造成干擾，另一方面在中國來說瓶裝水生產的標準都是自己的企業標準，娃哈哈純凈水的標準更加接近超純水無任何的雜質。

目前娃哈哈純凈水標準已經開始申請為國家標準。

純凈水是指其水質清純，不含任何有害物質和細菌，如有機污染物、無機鹽、任何添加劑和各類雜質，有效的避免了各類病菌入侵人體，其優點是能有效安全地給人體補充水份，具有很強的溶解度，因此與人體細胞親合力很強，有促進新陳代謝的作用。

六、高效液相色譜中苯甲醚的保留時間？

高效液相色譜中保留時間和流動相組成有關，也和色譜柱型號有關。不限定條件，問保留時間沒有意義！

七、高效液相色譜圖的保存？

最簡單的辦法教你怎么把高效液相色譜圖保存在WORD中.

你可以先打開高效液相色譜圖，然后按住鍵盤上的alt+print screen鍵，把這張圖截取下來，然后新建一個圖畫板，把它粘貼在里面，保存或稍做修改后保存即可。

最后在word中，點插入圖片命令，瀏覽到這個圖片就可以插入了，簡單吧？ 祝你好運！

八、高效液相色譜的收集方法？

是做二維分離用么？如果儀器允許，最好是弄個在線二維分離的泵和柱子，如果沒有，那就根據需求每30秒或1分鐘在排液口用小管兒接就行，可能有點兒狼狽，但效果還行

九、高效液相的原理是什么？

高效液相色譜法的原理是以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測。

十、高效液相色譜的相關術語？

色譜圖(chromatogram)——樣品流經色譜柱和檢測器，所得到的信號-時間曲線，又稱色譜流出曲線(elution profile)。

基線(base line)——經流動相沖洗，柱與流動相達到平衡后，檢測器測出一段時間的流出曲線。一般應平行于時間軸。

噪音(noise)——基線信號的波動。通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。

漂移(drift)——基線隨時間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩定所引起，柱內的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產生漂移。

色譜峰(peak)——組分流經檢測器時響應的連續信號產生的曲線。流出曲線上的突起部分。正常色譜峰近似于對稱形正態分布曲線（高斯Gauss曲線）。不對稱色譜峰有兩種：

前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。前者少見。

峰底—基線上峰的起點至終點的距離。

峰高(peak height，h)—峰的最高點至峰底的距離。

峰寬（peak width，W)—峰兩側拐點處所作兩條切線與基線的兩個交點間的距離。W=4σ

半峰寬（peak width at half-height，Wh/2)—峰高一半處的峰寬。Wh/2=2.355σ

峰面積(peak area，A)—峰與峰底所包圍的面積。

保留時間(retention time，tR)——從進樣開始到某個組分在柱后出現濃度極大值的時間。

理論塔板數(theoretical plate number，N)——用于定量表示色譜柱的分離效率（簡稱柱效）。

分離度(resolution，R)——相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率，表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱為完全分離。

《中國藥典》規定R應大于1.5。

拖尾因子(tailing factor，T)——T=，用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetry factor)或不對稱因子(asymmetry factor)。

《中國藥典》規定T應為0.95~1.05。

T1.05為拖尾峰。