一、測定酶活力的實驗步驟？

一)制作對—硝基苯酚(pNP)標準曲線

按下表分別取不同體積的對—硝基苯酚(4mM)，用50mM醋酸緩沖溶液(pH5.6)稀釋成一系列濃度。然后在分光光度計上測定λ=410nm處的光密度，以濃度為橫坐標，光密度為縱坐標作曲線。

(二)α-葡萄糖苷酶活力測定

取 0.8mL對—硝基苯酚α-D-葡萄糖苷(pNPG)(1.25mM)，加入 0.2mL大曲浸提液，迅速混勻后于40℃水浴中保溫10分鐘，取出并立即加入2mL 1 M的碳酸鈉溶液終止反應，用分光光度計測定λ=410nm處的光密度，在標準曲線上查出相當于對—硝基苯酚的量，并計算酶活力。酶活力單位定義為：在上述分析條件下每分鐘催化形成一個微摩爾pNP所需要的酶量為一個活力單位。

五、計算

V—酶液量mL；

n:—酶液稀釋倍數；

t—反應時間(min)

二、旋光法測定酶活力原理？

酶活性測定法是利用酶能專一而高效地催化化學反應的性質，通過測定酶促反應速度來檢知體液等生物樣品中某種酶的含量和活性的分析技術。

酶促反應速度的測定可采用兩種方式：

一是測定完成一定量反應所需的時間;二是測定單位時間內的酶促反應量。前者稱為終點法，后者稱為動力學法。

終點法是在特定條件下，將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物，然后根據反應進行到某一程度

三、為什么采用紫外吸收測定酶活力？

因為對紫外線的吸收越強，可以說明酶的活力越強。

四、中性蛋白酶活力測定方法？

酸性、中性蛋白酶活力單位在一定溫度(40oc土o.2OC)和相應的pH條件下(酸性蛋白酶pH3.0，中性蛋白酶pH7.2)，在1min內水解酷蛋白產生相當于1問酣基氨基酸(由酷氨酸等同物表示)的酶量，為1個酶活單位，以U表示。

　　蛋白酶在一定的溫度和pH條件下，水解酷蛋白底物產生含有酣基的氨基酸(如z酷氨酸、色氨酸)，在堿性條件下，可將福林試tj(Fo!in)還原，生成鋁藍與鵲藍，其顏色的深淺與酣基氨基酸含量成正比。通過在680nm測定其吸光度，得到酶解產生的酣基氨基酸的量，進而計算蛋白酶活力。

　　試劑和材料：碳酸鈾溶液、三氯Z酸溶液、鹽酸溶液、鹽酸溶擅液、氫氧化納溶液。

　　福林(Folin)試劑于2000mL磨口回流裝置中加入鴿酸鈾(Na2W040)100.0g、鋁酸鈾(Na2Mo0425.0g、水700mL、85%磷酸50mL、被鹽酸100h，取下回流冷卻器，在通風櫥中加入硫酸鏗(Li2S04)50g，水50mL和數滴濃澳水(99%)，再微沸15min，以除去多余的澳(冷卻后仍有綠色需再加澳水，再煮沸除去過量的澳)，冷卻后加水定容至1000mLot昆勻、過濾。試劑應呈金黃色，貯存于棕色瓶內。使用時，以1份福林(Folin)試劑與2份水混勻，制成稀福林(Folin)試劑。

五、土壤磷酸酶活性的測定方法？

土壤酶活性的測定方法

土壤酶活性的測定：酸性磷酸酶采用磷酸苯二鈉比色法測定；過氧化氫酶活性采用KMnO4滴定；脲酶采用擴散滴定法測定；蛋白酶活性采用茚三酮比色法測定；轉化酶活性以0.1N的Na2S2O3滴定法測定；脫氫酶活性采用三苯基甲比色法。

六、為什么測定酶活力的試劑要預熱？

讓其先達到最適溫度，再進行測試。因為酶的催化速率是很驚人的，所以必須讓其一測試就是最佳狀態。酶活力的大小，可以用在一定條件下它所催化的某一化學反應的速度來表示，酶催化的反應速度越大，則酶活力也越溫度大，所以測定酶的活力就是測定酶促反應的速度。

而溫度、PH、底物濃度、酶濃度、抑制劑、激活劑和反應時間等均能影響酶促反應速度，因此需要嚴格控制。

七、為什么酶活力測定時應以測定酶促反應的初速度為正？

適反應溫度，酶活力將會下降。

④PH對酶活力的影響：酶在最適PH范圍內表現出活性，大于或小于最適PH，都會降低酶活性。

⑤激活劑對酶活力的影響：某些無機陽離子、陰離子、有機化合物可作為激活劑，能夠激活酶，使其表現出催化活性或強化其催化活性。

⑥抑制劑對酶活力的影響：酶的抑制劑能夠減弱、抑制甚至破壞酶的活力，它可降低酶促反應速度。

八、測定酶活力時為什么要加過量的底物？

在一般的酶促反應體系中,底物往往是過量的,測定初速度時,底物減少量占總量的極少部分,不易準確檢測,而產物則是從無到有,只要測定方法靈敏,就可準確測定.因此一般以測定產物的增量來表示酶促反應速度較為合適. 測初速度的原因也是這個,因為只有在初速度下,才能保證底物過量,酶被完全飽和,如果你用反應中某一階段的速度的話,很難保證底物還是過量的,

九、土壤的羥胺氧化還原酶的測定方法？

本發明涉及土壤中羥胺還原酶活性的測定，具體地說是。背景技術 土壤中的羥胺還原酶能將在土壤中氮代謝(亞硝酸鹽的還原或者氨的氧化)過程中形成的中間產物羥胺還原成氨，土壤中的還原態化合物可作為氫的供體。因此，土壤中羥胺還原酶活性的強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發損失，間接影響氮肥的利用效率。土壤中羥胺還原酶的活性受土壤條件如水分、溫度、土壤質地的強烈影響，同時也受到農田耕作制度、管理措施以及不同作物的影響。因此，對土壤中羥胺還原酶活性的檢驗有很重要的意義。...

該技術已申請專利，請尊重研發人員的辛勤研發付出，在未取得專利權人授權前，僅供技術研究參考不得用于商業用途。

十、酶的活力回收率和相對酶活力？

酶活力單位：用來表示酶活力大小的單位，通常用酶量來表示。

其中一個稱酶活力國際單位，規定為：在特定條件下，1分鐘內轉化1微摩爾底物，或者底物中1微摩爾有關基團所需的酶量，稱為一個國際單位（IU，又稱U）。另外一個國際酶學會議規定的酶活力單位是Kat，規定為：在最適條件下，1秒鐘能使1摩爾底物轉化的酶量。Kat和U的換算關系：1 Kat=6×107U， 1U=16.67n Kat 酶的比活力（specific activity）：是指每毫克質量的蛋白質中所含的某種酶的催化活力。是用來度量酶純度的指標。酶的回收率是指純化后（反應后）的酶的總活力與純化前（反應前）的酶的總活力之比。純化倍數是指某步驟后的酶活力與該步驟前的酶活力之比。